El tejido dental como estudio cientfico en la identificacin gentica en odontologa forense. El ADN pulpar y la dentina mediante la racemizacin del cido asprtico. Revisin de literatura.

Dental tissue as a scientific study in genetic identification in forensic dentistry. Pulp and dentin DNA through aspartic acid racemization. Literature review.

O tecido dentrio como estudo cientfico na identificao gentica em medicina dentria forense. DNA da polpa e da dentina atravs da racemizao do cido asprtico. Reviso da literatura.

Jenny Edith Collantes Acua II

jennyc@uhemisferios.edu.ec

https://orcid.org/0000-0002-8088-2896

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Mateo Andrs Salinas Flores I

teo1salinas13@gmail.com

https://orcid.org/0009-0003-6771-2766

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Luis Alberto Vallejo Izquierdo III

luis-v@uhemisferios.edu.ec

https://orcid.org/0000-0002-0220-394X

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 


Correspondencia: teo1salinas13@gmail.com

 

 

Ciencias de la Salud

Artculo de Investigacin

 

* Recibido: 26 de septiembre de 2025 *Aceptado: 25 de octubre de 2025 * Publicado: 25 de noviembre de 2025

 

       I.          Universidad Hemisferios Sociedad Ecuatoriana de Salud Pblica SESP, Ecuador

      II.          Universidad Hemisferios, Quito, Ecuador

    III.          Universidad Hemisferios, Quito, Ecuador.

 

 

 

 


Resumen

Objetivo: A travs de una revisin bibliogrfica en las bases de datos PubMed y Scielo entre 2012 y 2024. Este estudio pretende valorar la utilidad del tejido dental como herramienta de identificacin gentica en escenarios forenses, poniendo nfasis en el ADN pulpar y en la dentina mediante la racemizacin del cido asprtico. Materiales y mtodos: Se llev a cabo un estudio descriptivo basado en bsquedas en PubMed y Scielo; se incluyeron artculos en espaol e ingls publicados entre 2012 y 2024, aplicando la estrategia PICO con los trminos Pulpa dental, ADN, Forense, cido asprtico y Dentina. Resultados: Se consider para esta revisin 32 artculos, sin embargo, despus de la lectura y exclusin, la seleccin arroj 13 artculos considerados adecuados para cumplir con los objetivos planteados de esta revisin de literatura. Conclusin: La odontologa forense es una herramienta fundamental para la identificacin mdico-legal tanto en vida como despus de la muerte; la obtencin de ADN de los tejidos dentales posibilita la individualizacin y la estimacin de la edad. La variacin en la celularidad y el contenido mineral de esmalte, dentina, pulpa y cemento genera un contexto bioqumico y anatmico particular para investigar la conservacin y la degradacin post mortem del ADN; estructuralmente la dentina se utiliza cuando la pulpa est ausente, aunque la pulpa, por su proteccin y mayor densidad celular, suele ofrecer mejores rendimientos de ADN y mayor eficacia en la identificacin.

Palabras clave: Pulpa Dental, ADN, cido Asprtico, Dentina y Odontologa Forense

Abstract

Objective: Through a literature review of the PubMed and SciELO databases between 2012 and 2024, this study aims to assess the usefulness of dental tissue as a genetic identification tool in forensic scenarios, emphasizing pulp DNA and dentin DNA through aspartic acid racemization. Materials and methods: A descriptive study was conducted based on searches in PubMed and SciELO. Articles in Spanish and English published between 2012 and 2024 were included, applying the PICO strategy with the terms Dental pulp, DNA, Forensic, Aspartic acid, and Dentin. Results: Thirty-two articles were considered for this review; however, after reading and exclusion, the selection yielded 13 articles deemed suitable to meet the objectives of this literature review. Conclusion: Forensic dentistry is a fundamental tool for medicolegal identification both during life and after death. Obtaining DNA from dental tissues allows for individualization and age estimation. The variation in cellularity and mineral content of enamel, dentin, pulp, and cementum creates a unique biochemical and anatomical context for investigating postmortem DNA preservation and degradation. Structurally, dentin is used when pulp is absent, although pulp, due to its protective properties and higher cell density, generally offers better DNA yields and greater effectiveness in identification.

Keywords: Dental Pulp, DNA, Aspartic Acid, Dentin, Forensic Dentistry

 

Resumo

Objectivo: Atravs de uma reviso bibliogrfica nas bases de dados PubMed e Scielo entre 2012 e 2024. Este estudo pretende valorizar a utilizao do tecido dentrio como ferramenta de identificao gentica em cenrios forenses, dando nfase ao ADN pulpar e dentina atravs da racemizao do cido asprtico. Materiais e mtodos: Foi realizado um estudo descritivo baseado em pesquisas na PubMed e Scielo; foram includos artigos em espanhol e ingls publicados entre 2012 e 2024, aplicando a estratgia PICO com os termos Pulpa dentria, ADN, Forense, cido asprtico e Dentina. Resultados: Se considerados para esta reviso 32 artigos, sem embargo, aps a palestra e excluso, a seleo arrojou 13 artigos considerados adequados para cumprir os objetivos plantados desta reviso de literatura. Concluso: A medicina dentria forense uma ferramenta fundamental para a identificao mdico-legal tanto na vida como aps a morte; a obteno de ADN dos tecidos dentrios possibilita a individualizao e a estimativa da idade. A variao na celularidade e no contedo mineral de esmalte, dentina, polpa e cimento gera um contexto bioqumico e anatmico especfico para investigar a conservao e a degradao post mortem do ADN; estruturalmente a dentina utilizada quando a polpa est ausente, embora a polpa, por sua proteco e maior densidade celular, eles oferecem melhores desempenhos de ADN e maior eficcia na identificao.

Palavras-chave: Pulpa Dentria, ADN, cido Asprtico, Dentina e Odontologa Forense

 

 

 

Introduccin

La identificacin implica un proceso comparativo y reconstructivo orientado a situar a un individuo desconocido dentro de un conjunto biosocial, entendido como un grupo de personas con orgenes y caractersticas genticas y morfomtricas afines. (Caiza, 2024).

Al tener la duracin de gestacin ms prolongada de todos los rganos del cuerpo humano, la denticin alberga ms informacin de su existencia que cualquier otro componente del cuerpo (Sperber, 2017). Los dientes son una fuente esqueltica preferida de ADN por varias razones.

Tanto en el maxilar superior como inferior, por su estructura y localizacin, internamente estn en gran medida protegidos de las condiciones fsicas y ambientales que actan aceleradamente en la descomposicin tanto en post mortem y el ADN. Por lo tanto, el ADN extrado de los dientes suele ser de mayor calidad y es menos propenso a la contaminacin que el ADN extrado de los huesos (Higgins, 2013).

Los perfiles biolgicos comnmente incluyen sexo, edad, ascendencia y altura. Por lo tanto, la estimacin de la edad es uno de los componentes clave que se utiliza para la identificacin de los restos. Los rganos dentales son las estructuras ms duras del cuerpo humano y pueden sobrevivir despus de la descomposicin de todo lo dems. En particular, la pulpa dental est protegida de las agresiones externas por tejidos duros. (Zapico, 2021). Tradicionalmente, los dientes se han utilizado como fuente de ADN cuando se han perdido todos los dems tejidos o no han producido suficiente ADN para la identificacin. La pulpa dental est revestida de un esmalte dental extremadamente resistente y, por lo tanto, constituye una fuente protegida de ADN mitocondrial y nuclear para la genotipificacin. (Stamm, 2016). Se ha observado una mayor recuperacin de ADN en dientes con abundante pulpa y en piezas multirradiculares frente a las unirradiculares (Higgins, 2013).

Para la estimacin de edad en contextos forenses es frecuente el uso de la racemizacin del cido asprtico (AAR); la dentina, por ser un tejido braditrfico, se considera preferente para esta tcnica, mostrando correlacin entre los niveles de D-Asp y la edad (Sirin, 2018). Por tanto, el objetivo de este trabajo fue valorar la importancia del tejido dental como mtodo de identificacin gentica en forense mediante una revisin de la literatura en Scielo y PubMed entre 2012 y 2024.

Materiales y mtodos

Se realiz una investigacin de carcter descriptivo empleando los buscadores Scielo y PubMed. Se incorporaron artculos en espaol e ingls publicados entre 2012 y 2024. La estrategia de bsqueda se dise conforme al enfoque PICO con los descriptores: Pulpa dental, ADN, Forense, cido Asprtico y Dentina. Se busc y recopil informacin detallada relacionada con el tema, abarcando objetivos, autores, ao de publicacin, metodologa, metaanlisis, revisiones sistemticas y revisiones de literatura que tratan dos mtodos cientficos en la identificacin gentica en forense en el tejido dental como es la pulpa y la dentina mediante la racemizacin del cido asprtico. Se excluyeron todos los estudios que no abordaban esta relacin en identificacin gentica forense.

De un total de 32 artculos encontrados. Tras aplicar los criterios de exclusin mediante un anlisis de ttulos y resmenes, se descartaron 8 artculos, resultando en 24. El ltimo criterio evaluado fue la comprobacin de si los artculos cumplan con los requisitos de fecha de publicacin y si contenan informacin suficiente sobre el ADN pulpar y la racemizacin del cido asprtico en dentina como mtodos cientficos de identificacin gentica en forense en el tejido dental, se descartaron 11 articulos, lo que condujo a la seleccin final de 13 artculos. Estos incluan revisiones de literatura y revisiones sistemticas ya que proporcionaban informacin relevante sobre el tema. Posteriormente, se descarg el texto completo de los artculos seleccionados.

 

 

 

 

 

 

 

Tabla 1. Diagrama de bsqueda y seleccin de articulos empleados en la revisin de literatura.

Resultados

Para el presente trabajo se utilizaron un total de 13 artculos, los cuales elegidos teniendo en cuenta su ttulo, ao, objetivo, materiales y mtodos. Adicionalmente en la presente tabla se coloc informacin importante sobre cada uno de ellos (tabla 2).

Tabla 2. Resultados de los mtodos de identificacin forense empleados en la revisin de literatura

Anlisis sobre los mtodos cientficos en identificacin gentica en forense sobre el tejido dental.

Tabla 2

Autor

Objetivo

Materiales y mtodos

Resultados

Conclusin

Salazar, C et al., 2012 (1)

Se busca implementar de manera exitosa la tcnica para determinar la edad en el mbito de la prctica forense.

Se llev a cabo una revisin exhaustiva de la literatura, evaluando la efectividad y precisin del mtodo basado en el AAR aplicado a la dentina en odontologa forense.

La dentina ofrece una alternativa viable y eficiente para emplear el mtodo de AAR, logrando una precisin aproximada de 3 aos.

Este tejido se considera el ms adecuado para establecer la edad mediante el AAR y ha sido utilizado en diversos estudios forenses, proporcionando resultados tcnicos que pueden ser altamente satisfactorios.

Mahlke, N et al., 2021 (2)

Se investig si estos mtodos son aplicables tambin en casos con intervalos posdeposicionales mucho ms all del perodo forense

relevante para dos "relojes proteicos": la acumulacin de cido D-asprtico (D-Asp) y la acumulacin de pentosidina (Pen) en dentina.

Se analizaron ocho dientes de esqueletos de diferentes yacimientos funerarios de Austria, con intervalos posdeposicionales entre c. 1216 y c. 8775 aos.

Dado los resultados de la estimacin de edad al fallecimiento basados en D-Asp y Pen en dentina se compararon con los obtenidos a partir de un examen

morfolgico clsico. La estimacin de la edad al fallecimiento basada en D-Asp arroj sistemticamente valores altos falsos.

Por el contrario, las estimaciones de

edades basadas en Pen se ajustaron bien a los diagnsticos de edad morfolgica.

El efecto descrito de la degradacin proteica post mortem es

insignificante en horizontes temporales de relevancia forense, pero no para intervalos posdeposicionales de miles de aos. Esto significa que el reloj

de D-Asp pierde su funcionalidad al aumentar los intervalos posdeposicionales, mientras que Pen parece ser muy estable.

Kumar, P et al., 2018 (3)

Evaluar la AAR en

tejidos dentinarios de dientes cariados para determinar la estimacin en la prctica forense de la

edad dental.

Analizaron nicamente 25

dientes cariados extrados de 23 individuos y utilizaron nicamente tres

dientes sanos para la comparacin.

Observaron que existe una amplia variacin entre las

edades dentales estimadas y las edades reales al analizar el tejido

dentinario de dientes cariados en comparacin con el de dientes sanos.

La caries puede afectar significativamente

la precisin de la determinacin de la edad basada en la AAR. Sin embargo, tenemos ciertas reservas sobre la

metodologa empleada y las conclusiones extradas en el estudio, que

deben ser profundizadas para una mejor comprensin de esta importante

investigacin.

Sirin, N et al., 2017

(4)

Examinar

sistemticamente muestras de dentina preparadas estandarizadas de

dientes afectados por caries para aclarar la pregunta, si los dientes

afectados por caries no deben usarse para la estimacin de la edad

basada en AAR en absoluto, o si el anlisis de muestras de dentina de

dichos dientes pueden ser til despus de la eliminacin del tejido

afectado por caries segn los estndares clnicos.

Se analizaron noventa y nueve muestras estandarizadas de dentina

radicular preparada (cubo) de 25 muelas del juicio con lesiones cariosas

(23 individuos, con edades comprendidas entre 21 y 79 aos). Para

comprobar la influencia del mtodo de preparacin, se analizaron, adems

tres muelas del juicio sanas (de 3 individuos, con edades comprendidas

entre 17 y 35 aos). Las muestras se tomaron de dientes vitales sin obturaciones ni

restauraciones radiculares.

La caries puede causar una degradacin proteica extensa incluso en dentina de aspecto sano, afectando la precisin de la AAR.

Para estimar la edad de forma fiable con AAR se recomiendan muestras de dientes sanos; si solo se dispone de dientes cariados, analizar al menos dos dientes del mismo individuo y proceder con cautela en la interpretacin.

Elfawal, M et al., 2014

(5)

Aplicar la racemizacin del cido asprtico en dentina radicular para estimar edad en una poblacin kuwait.

Una poblacin kuwait utilizando dentina radicular de un

total, de 89 primeros premolares superiores.

La relacin D/L del cido asprtico se obtuvo mediante la tcnica HPLC en un grupo de prueba de 50 sujetos

y se estableci una lnea de regresin lineal entre la racemizacin del cido asprtico y la edad.

Para la evaluacin de la edad por

racemizacin tiene mayor importancia el tipo de diente elegido que las variaciones tnicas. Por lo tanto, se requiere ms

investigacin en esta rea para determinar si nuestros hallazgos y la frmula propuesta se pueden aplicar a otras poblaciones. Mientras tanto,

cabe destacar que la estimacin de la edad por AAR a partir de dientes

necesita requisitos tcnicos especficos con un alto grado de estandarizacin

que, en general, no estn disponibles en todos los laboratorios forenses y,

por lo tanto, no se pueden emplear como una herramienta rutinaria para la

estimacin de la edad, en particular en los pases en desarrollo.

Wochna, K et al., 2018 (6)

Valorar la aplicabilidad de la enantiomera AAR en dentina coronal y radicular para estimar edad en una muestra polaca.

Fueron extrados de 16 cadveres varones que se sometieron a autopsias medicolegales

(judiciales) en el Departamento de Medicina Forense de la Universidad

Mdica de Lodz entre los aos 2012 y 2014.

. Se estudi la dentina coronal y radicular de cuatro grupos

de dientes de la mandbula mediante cromatografa de gases con espectrometra de masas.

Los resultados demostraron una correlacin muy alta entre

la edad cronolgica y la composicin enantiomrica en ambas muestras de dentina. Las ecuaciones lineales individuales de la dentina radicular con

coeficientes de correlacin entre 0,96 y 0,98 y un error de estimacin estndar de 2,95 4,84 aos validaron la aplicacin de la racemizacin del cido

asprtico como una contribucin prctica significativa a la prctica mdica forense diaria.

El mtodo de racemizacin del cido asprtico utilizando dentina radicular permite para obtener estimaciones precisas de la edad.

La edad estimada se pudo calcular con alta precisin. Adems, los parmetros de regresin lineal confirmaron que la

credibilidad de tales resultados era muy slida

Sin embargo, este estudio inicial debera repetirse con diferentes muestras, no slo de personas de otras reas geogrficas polacas, pero tambin con dientes femeninos y maxilares anteriores, para concluir si este mtodo es aplicable a toda la poblacin polaca.

Dutta, P et al., 2017 (7)

Determinar el sexo mediante una muestra de ADN obtenida de la dentina o la pulpa dental y ayudar en la identificacin de personas desaparecidas y

vctimas de desastres.

Se estudiaron 50 muestras de dientes y

fueron sometidos a diversas condiciones ambientales.

Se utilizaron dientes recin extrados como control durante un mes y tres meses.

Se obtuvo tejido pulpar de las muestras dentales mediante la apertura de conductos

radiculares y, en el caso de las muestras incineradas, se trituraron.

La prueba ANOVA y la prueba T resultaron estadsticamente

significativas y se observ una tasa de recuperacin del 100% en las muestras.

El tejido pulpar junto con los procesos odontoblsticos degenerativos

producen una cantidad suficiente de ADN para la determinacin del gnero cuando

se someten a diversas condiciones forenses con la mxima precisin.

Stamm, S et al., 2016

(8)

Comparar dos mtodos para preparar polvo de dentina a partir de races de dientes con

problemas ambientales para analizar el ADN en la prctica forense.

Los dentistas recogieron muestras dentarias (n = 14) e hisopos bucales de referencia

de siete pacientes sometidos a extracciones dentales rutinarias.

Se realizaron 2 mtodos de extraccin de ADN; mtodo de limado y mtodo de molienda.

 

El mtodo de limado era ms laborioso y produca menos polvo de dentina, la cantidad de ADN

amplificable por miligramo de polvo era considerablemente mayor con este mtodo que con el pulido de toda la raz.

El ADN total obtenido con el mtodo de limado fue mayor que con el

mtodo de pulido.

El mtodo

de limado produjo ms ADN amplificable por

miligramo de polvo que moler toda la raz en todas las muestras,

independientemente de la exposicin ambiental.

Si bien se han descrito previamente otros mtodos de extraccin de tejido rico en ADN de la cmara pulpar,

el mtodo de limado es mnimamente invasivo, lo que permite preservar la morfologa del diente y la corona.

Coello, J et al., 2024 (9)

Realizar una revisin sistemtica de la literatura sobre las tcnicas aplicadas en la identificacin forense de restos humanos en Ecuador, con el propsito de identificar los progresos y obstculos asociados a estos mtodos.

Para este estudio, se seleccion y recopil informacin actualizada de bases de datos cientficas, textos relevantes y normativas pertinentes al tema.

Mediante un anlisis terico y bibliogrfico de artculos acadmicos y libros, se obtuvo informacin contempornea sobre los mtodos de identificacin humana en cuerpos. Esta informacin permiti entender mejor los desafos y avances que enfrenta la criminalstica en sus diversas reas.

Aunque existen mltiples mtodos para identificar cadveres en el pas, su eficacia depende de factores como la gentica, la antropologa o la odontologa forense, especialmente cuando los mtodos convencionales no garantizan una identificacin clara e indiscutible del cuerpo.

Sperber, GH et al., 2017 (10)

Se analiza la informacin que se puede extraer de los dientes

Se realiz una revisin bibliogrfica.

 

El papel de los dientes como indicadores del estilo de vida del pasado y del presente, y como elementos clave de los estudios

evolutivos y forenses.

Los dientes proporcionan registros quimogrficos de las vidas

vividas desde el tero hasta la tumba. La interpretacin de esta

informacin odontolgica ofrece mucho que analizar

Las nuevas tecnologas estn extrayendo la informacin consolidada sobre la estructura del esmalte, la dentina

y el ADN de las clulas de la pulpa dental.

Higgins, D et al., 2015 (11)

Investigar la distribucin del ADN y las tasas de degradacin del ADN.

Se realiz un examen gentico e histolgico combinado del contenido de ADN y las tasas

de degradacin del ADN en los diferentes tejidos dentales de 150 molares humanos en intervalos post mortem cortos-medios. Se extrajo ADN de la dentina coronaria, dentina radicular, cemento y pulpa de 114 dientes mediante un mtodo de columna de slice y los 36 dientes restantes se examinaron

histolgicamente.

Los ensayos de cuantificacin en tiempo real basados en dos fragmentos de ADN

nuclear y un fragmento de ADN mitocondrial mostraron que el ADN nuclear y mitocondrial se degradaba exponencialmente, pero a diferentes tasas, dependiendo del intervalo post mortem y la temperatura del suelo. A diferencia de estudios previos, identificamos una supervivencia diferencial del ADN nuclear y ADN en diferentes tejidos dentales. Adems, el examen histolgico

mostr que la pulpa y la dentina se vieron rpidamente afectadas por la prdida de integridad estructural, y la pulpa se destruy completamente en un perodo de tiempo relativamente corto.

El muestreo selectivo de cemento de dientes enterrados hasta 16 meses puede proporcionar una fuente fiable de ADN nuclear para la genotipificacin basada en STR mediante mtodos de extraccin estndar, sin necesidad de equipos especializados ni grandes etapas de desmineralizacin.

Zapico, S et al., 2021 (12)

Ampliar el alcance de este trabajo mediante el anlisis de la metilacin del ADN en la pulpa

dental de individuos adultos.

Se extrajeron terceros molares sanos erupcionados de individuos de entre 22 y 70 aos. Se aisl el ADN de la pulpa y se convirti con bisulfito. La pirosecuenciacin fue la tcnica elegida para

evaluar la metilacin del ADN.

Los resultados proporcionan una gran

precisin, con un Error Absoluto Medio (EMA) entre la edad prevista y la cronolgica de 1,5 a 2,13 aos para estimar la edad al morir en adultos.

Describe por primera vez la aplicacin de la metilacin del ADN para determinar la edad en tejidos pulpares mediante pirosecuenciacin. La precisin es excelente, superando a otras tcnicas de

estimacin de la antropologa forense.

Investigaciones futuras

ampliarn estos resultados incrementando el nmero de dientes, explorando otros marcadores e investigando las

agresiones tafonmicas y ambientales.

Higgins, D et al., 2013 (13)

Revisar la morfologa dental en relacin con la distribucin y preservacin del ADN y cmo los cambios post mortem afectan su recuperacin segn distintos protocolos.

Se realiz una revisin de literatura y se destac las ventajas y desventajas del uso de tejidos dentales especficos para la extraccin de ADN y ofrecemos recomendaciones para la seleccin y el muestreo de dientes que maximizarn el xito de la tipificacin de ADN.

Una comprensin integral de la estructura dental y una apreciacin de la relacin entre el ADN y los tejidos mineralizados en los dientes post mortem son fundamentales para una seleccin ptima de la muestra.

Mtodos de muestreo ms informados, enfocados en tejidos dentales especficos, aumentarn la probabilidad de un anlisis gentico exitoso y permitirn un trabajo de casos de personas desaparecidas eficiente y oportuno, as como una respuesta de identificacin de vctimas de desastres.

Los dientes son una excelente fuente de ADN nuclear y mitocondrial, y se han utilizado con xito en la identificacin forense de restos seos humanos comprometidos.

Es evidente que una comprensin completa de la estructura y composicin dental, as como del proceso de diagnesis, es crucial para determinar la ubicacin del ADN en dientes post mortem. Esto permitir una seleccin ms adecuada de muestras y tcnicas de muestreo.

Desarrollo

El tejido dental

En caso de un incidente con gran mortalidad, el ADN desempea un papel vital en la identificacin de las vctimas. Dado que los dientes poseen una rica fuente de informacin gentica, son la opcin preferida para extraer ADN con fines de identificacin. La dentina y el esmalte son estructuras altamente calcificadas en el cuerpo que resisten la descomposicin, lo que los convierte en una mejor fuente de ADN (Dutta, 2017).

Los dientes, comnmente utilizados para identificaciones forenses y estudios de ADN antiguo, ofrecen un gran potencial para el muestreo dirigido en diversas etapas de la vida en el intervalo post mortem (PMI) y para examinar la degradacin del ADN a corto plazo. Su ubicacin anatmica y su estructura morfolgica proporcionan una proteccin nica al ADN endgeno contra la degradacin post mortem. Adems, la variacin en celularidad y contenido mineral entre esmalte, dentina, pulpa y cemento crea un entorno anatmico y bioqumico idneo para analizar la conservacin y prdida post mortem del ADN. El muestreo convencional de dientes para el anlisis de ADN generalmente sigue una de dos vas: el muestreo dirigido de la pulpa (el componente de tejido blando del diente rico en ADN) mediante la apertura del diente o la perforacin a travs de la corona, o el muestreo no dirigido de todo el diente (o raz). El pulido de todo el diente proporciona acceso a la mayor cantidad de ADN, pero tambin incluye una gran cantidad de minerales (el cemento est compuesto en un 45 %, la dentina en un 70 % y el esmalte en un 97 % de minerales) que deben eliminarse antes del anlisis posterior (Higgins, 2015).

La corona, dominada por esmalte, aporta mucho menos ADN que las races, donde predominan dentina, pulpa y cemento; incluso cuando la pulpa est presente, el rendimiento de ADN de la corona suele ser diez veces inferior al de las races. El complejo dentina/pulpa constituye la mayor fraccin no mineralizada del diente. La pulpa, tejido conectivo inervado y altamente vascularizado contiene odontoblastos, son las clulas ms producidas en la pulpa dental, aproximadamente 11.000 por mm2 y los fibroblastos, se ha estimado en 1000 por mm2. Por lo tanto, como aproximadamente 80 clulas diploides pueden producir la cantidad mnima de ADN necesaria para la tipificacin de STR (Higgins, 2013).

ADN pulpar

La pulpa dental est protegida de las agresiones externas por tejidos duros. La pulpa se encuentra en la regin central del diente y est formada por un tejido estromal que contiene nervios, sangre y vasos linfticos. Su ubicacin y estructura nicas la convierten en el tejido predilecto para el anlisis de ADN (Zapico, 2021).

En Estados Unidos, los odontlogos por sus avances cientficos utilizan a la biologa molecular junto a la bioqumica dentaria para determinar la identidad y la edad del cadver mediante el anlisis del ADN de la pulpa. El procedimiento de identificacin se centra en las caractersticas dentales y la denticin y posterior a esto se compara en los casos donde el cadver y los restos hayan estado expuestos a condiciones extremas, como descomposicin avanzada, quemaduras graves, en dichos casos la funcin del forense es tomar el ADN de la pulpa dental dando una identificacin fiable y detallada incluso en situaciones adversas. (Coello, 2024)

La pulpa se descompone ms lentamente que otros tejidos blandos, mantenindose parcialmente viable (>50% clulas viables) hasta 12 h post mortem y con clulas detectables hasta 24 h. Un entorno seco favorece la desecacin y protege el ADN frente a la hidrlisis. Se ha demostrado la persistencia de pulpa en dientes sometidos a elevadas temperaturas (>100 C): hay informes donde terceros molares de cuerpos incinerados permitieron obtener ADN nuclear suficiente para generar perfiles STR y facilitar la identificacin. (Higgins, 2013)

Racemizacin del cido Asprtico

La identificacin es una de las funciones ms importantes del trabajo forense. El nmero de cadveres y restos humanos sin identificar en todo el mundo est en aumento. Los dientes, el tejido humano ms duro, son altamente resistentes a las influencias fsicas y qumicas. Incluso en casos de destruccin extensa del cuerpo, los dientes suelen conservarse, especialmente las muelas. (Elfawal, 2015).

Una de las tareas clave de la odontologa forense es la identificacin de cadveres de identidad desconocida, necesaria no solo por razones procesales y legales, sino tambin humanitarias. En el caso de cadveres o restos no identificados, la primera tarea consiste en establecer las caractersticas grupales del difunto, seguidas de sus caractersticas individuales, como el sexo y la edad cronolgica, determinndose estas ltimas con la mayor precisin posible. La odontologa forense busca, en primer lugar, establecer rasgos grupales del individuo y luego caractersticas individuales como sexo y edad, siendo la edad cronolgica un parmetro crtico. La AAR es un mtodo qumico de estimacin de la edad dental que se introdujo en la segunda mitad del siglo XX y actualmente para la estimacin de la edad, es de los ms precisos y fiables. El cido asprtico es un compuesto qumico orgnico y un aminocido proteico que est involucrado en muchos tejidos humanos, incluyendo la dentina dental. (Wochna, 2018)

La utilidad de los llamados relojes moleculares, como el reloj epigentico (basado en la metilacin del ADN) y los relojes proteicos (acumulacin de cido D-asprtico y pentosidina en protenas permanentes), para estimar la edad al morir mediante el anlisis de muestras de individuos con edades conocidas, y se confirm su alto potencial en el contexto forense (con intervalos cortos posteriores a la deposicin de hasta aproximadamente 50 aos). ( Mahlke, 2021).

En la prctica forense, la dentina es el tejido escogido para estimar la edad basada en el AAR, ya que es un tejido braditrfico que presenta una estrecha relacin entre el contenido de cido asprtico y la edad (Sirin,2017).

La racemizacin convierte progresivamente molculas pticamente activas hacia una mezcla racmica; la matriz orgnica relativamente homognea de la dentina facilita determinaciones precisas de edad a partir de dentina total o extractos cidos. La tcnica puede alcanzar una precisin cercana a 3 aos, siempre que se estandarice el procedimiento: curvas calibradas por tipo de diente, descontaminacin con hipoclorito, almacenamiento en condiciones secas y fras, evitar lavados con cidos, desmineralizacin a bajas temperaturas y pirlisis controlada. La temperatura es un factor crtico, ya que la AAR depende de ella, y factores como la caries, el tipo de diente y su posicin en la arcada influyen en la relacin D/L observada. (Salazar,2012).

Tecnicas para la extraccin de ADN en odontologa forense

La identificacin humana en cadveres integra mltiples disciplinas y niveles de trabajo (macro, meso, micro). A nivel macro se aplican protocolos internacionales (EE. UU., Australia, Reino Unido); en EE. UU. la odontologa forense compara rasgos dentales nicos con registros ante mortem. En Ecuador, aunque no se aplica de forma rutinaria a nivel micro, la odontologa forense ha sido til en casos de incineracin, desastres masivos y descomposicin avanzada, apoyndose en la comparacin de registros ante mortem y post mortem, ortodometra, prtesis, radiologa forense y necropsias bucales. (Coello, 2024).

Los mtodos para aislar material dental incluyen el tallado de todo el diente o de la raz, el seccionamiento vertical u horizontal en la unin esmalte-cemento, el acceso endodntico a la cmara pulpar mediante fresa, y tcnicas sin polvo que remojan la pieza en tampones de digestin. El mtodo histrico para dientes antiguos (mtodo de conducto radicular inverso) acceda a la dentina por el foramen apical. Pulverizar todo el diente maximiza la produccin de ADN, pero destruye la estructura, impidiendo anlisis morfolgicos o radiogrficos posteriores y potencialmente empeorando la calidad del ADN por el incremento de inhibidores y degradacin; por ello, se observ mayor inhibicin de la PCR y degradacin en extractos de diente completo frente a pulpa pura (Stamm, 2016).

Discusin

Las patologas dentales no solo disminuyen la cantidad de ADN disponible, sino que tambin incrementan el riesgo de contaminacin. Por lo tanto, los dientes seleccionados para el anlisis de ADN deben estar en condiciones ptimas y sin enfermedades. Los tejidos dentales presentan altas concentraciones de calcio (particularmente en el esmalte) y colgeno, que pueden complicar la amplificacin del ADN mediante la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) si se extraen simultneamente con este. Por ende, es fundamental que los protocolos de extraccin y muestreo dental se enfoquen en tejidos ricos en ADN, minimizando la recoleccin de aquellos con un alto contenido mineral y bajo contenido de ADN, as como reduciendo la coextraccin de sustancias que puedan inhibir el anlisis del ADN. La efectividad del anlisis gentico realizado en dientes depende de la cantidad total de ADN presente, el grado de degradacin y la eficacia de los mtodos utilizados para muestreo y extraccin. Se llevaron a cabo muestreos en 10 dientes sometidos a tratamiento endodntico (es decir, dientes cuya pulpa ha sido completamente removida), reportando rendimientos suficientes de ADN para obtener perfiles STR nucleares completos en ocho dientes, a pesar de la ausencia de pulpa. (Higgins, 2013)

Recientemente, la AAR en la dentina pareca ser la tcnica ms precisa para determinar la edad de individuos adultos. Sin embargo, la epigentica, el estudio de los cambios hereditarios en la expresin gnica ha demostrado ser una herramienta ms precisa y valiosa al estimar la edad. (Zapico, 2021)

Se ha evaluado la AAR en tejidos dentinarios de dientes cariados para la estimacin forense de la edad dental y han concluido que la caries puede afectar significativamente la precisin de la estimacin de la edad basada en la racemizacin del cido asprtico. Observaron que existe una amplia variacin entre las edades dentales estimadas y las edades reales al analizar el tejido dentinario de dientes cariados en comparacin con el de dientes sanos. Al comparar los niveles de cido asprtico en el tejido dentinario de dientes cariados con el de dientes sanos, mantener la homogeneidad entre las muestras de prueba (dientes cariados) y las muestras de control (dientes sanos) es fundamental. Los autores analizaron nicamente 25 dientes cariados extrados de 23 individuos y utilizaron nicamente tres dientes sanos para la comparacin. Incluso las variaciones de edad de los 23 individuos con dientes cariados son demasiado grandes, con un rango de 21 a 79 aos, en comparacin con los tres dientes sanos, cuya edad oscilaba entre los 17 y los 35 aos. (Kumar, 2018)

La temperatura es un factor ambiental crucial; se estima que una temperatura promedio constante de 15C durante ms de diez aos puede provocar un desfase estimado en 0.2 aos al evaluar la edad basndose en los dientes. En los casos de restos calcinados, los mrgenes de error pueden aumentar significativamente debido a una aceleracin del proceso de racemizacin del cido asprtico (AAR). Adems, se han observado variaciones en los valores relacionados con esta racemizacin dependiendo del tipo y ubicacin del diente dentro de la cavidad bucal. Considerando las complejidades asociadas a AAR, investigaciones recientes sugieren implementar mezclas estndar de aminocidos D y L o desarrollar nuevas metodologas para optimizar tanto esta tcnica como su aplicacin forense. La concentracin media del cido D-asprtico presente en los dientes disminuye segn el siguiente orden: primer molar > segundo molar > segundo premolar > primer premolar > canino > incisivo central > incisivo lateral. Dado que el desarrollo de la dentina ocurre desde la corona hacia el pice, la relacin entre D y L del cido asprtico es mayor en la corona y disminuye hacia el extremo radicular. Actualmente, el mtodo ms utilizado implica la racemizacin del cido asprtico, particularmente en dentina, logrando una precisin notable; estudios indican que presenta una exactitud aproximada de +/- 3 aos, siempre que el diente no est contaminado, afectado por caries o contenga un alto contenido mineral como el esmalte. Adems, se observa que el ADN tiende a ser ms abundante y celular en las races y molares. Es crucial evitar que las muestras sean manipuladas con las manos. (Salazar, 2012). Aunque este mtodo de identificacin sea efectivo en la prctica clnica, existen otros mtodos de identificacin forense como la rugoscopia y dactiloscopia, mtodos mucho ms efectivos y precisos.

Como se mencion anteriormente este mtodo de identificacin en un estudio macro, meso y micro el cual es muy limitado tanto en prctica como en estudio, debido al mandamiento de infraestructura como laboratorios especializados en pruebas de ADN, en investigacin, por su baja prctica y por ende su limitada existencia de articulos y por ltimo en recursos, son procesos de alta demanda de casos y poca inversin. Frente a esta situacin es importante entender la relacin costo-beneficio que implica este tipo de procedimientos cientficos y para su desarrollo deberamos plantearnos la ejecucin de estudios de cohorte y estudios con seguimiento longitudinal.

Conclusiones

La odontologa forense constituye un pilar en la identificacin mdico-legal tanto en etapas pre como post mortem. La extraccin y el anlisis de ADN dental permiten individualizar sujetos y estimar la edad. Estructuralmente la dentina se emplea cuando la pulpa no est disponible; sin embargo, la pulpa, debido a su proteccin y mayor concentracin celular, suele proporcionar un rendimiento superior y un rango de efectividad ms amplio que la dentina en la recuperacin de ADN con fines forenses.

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